ISO11137辐照灭菌剂量确认中文版 - 图文 - 下载本文

ISO11137-2

8.3.3.2 A 和 FFP

8.3.3.2.1 从三个批次每批增量剂量系列确定20个试样中至少一个是阴性的最低剂量,指定这些剂量为ffp并找出三个批次的中位ffp。如果第2和第3次表现出相同的ffp值,选择批次中提供更高或最高阳性数的剂量作为中位ffp。

8.3.3.2.2 从表8中获得中位ffp在无菌试验的不同阳性数时所对应的A值。

表8 中位ffp在不同无菌试样的阳性数时所对应的A值(方法2B) 中位ffp时的无菌试样阳性数 19 18 17 16 15 14 13 12 11 10 注:见公式(1)来计算A {log10(loge20)-log10[loge(20/n)]} A=(2kGy) {log10(loge20)-log10[loge(20/19)]} 这里n为无菌试验的阴性样本数 A kGy 0.00 0.13 0.22 0.31 0.38 0.45 0.52 0.58 0.65 0.72 中位ffp时的无菌试样阳性数 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 A kGy 0.79 0.87 0.95 1.05 1.15 1.28 1.43 1.65 2.00 2.00 (公式1) 8.3.3.2.3 从式(2)中计算FFP,见8.2.3.2.3 8.3.3.3 D

8.2.3.3.1 对三个生产批次中的每一批,按以下之一确定d

a) 找出所有试样中阴性的两个连续剂量的最低剂量,在随后的增量剂量系列的任何试验中阳性不得多于一个,或

b)找出20个试样中发生一个阳性的最低剂量,紧接之前的不超过1,仅为1,其后所有试样均为阴性的增量剂量。

8.3.3.3.2 如果三个生产批次每个都不符合本标准8.3.3.3.1a)或b),则增量剂量试验无效。在这种情况下,在调查试验的方法和执行纠正措施之后可以重新进行增量剂量试验。 8.3.3.3.3 按以下指定D,

A)如果最高批次d比中位d高出值小于5kGy,则中位批次d就成为D,或 B)如果最高批次d比中位d高出值大于等于5kGy,则最高批次d就成为D。 8.3.3.4 CD批次

确定d等于D的批次并将其指定为CD批次,如果一个以上批次d等于D,则可以随机选择其中之一作为CD。从CD批次中保留单元产品在方法2A步骤3中使用。从三个批次中取出保留的产品的存储条件应阻止微生物生长。可能的话,可以选择第四个批次作为CD。

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8.3.4 步骤3: 实施验证剂量实验

8.3.4.1从CD批次中选择100个单元产品以D剂量进行辐照。确定剂量并指定单元产品接受的最高剂量为DD。DD可以变化到D的+1.0kGy或+10%,取其中较大值。如果单元产品接受的最高和最低剂量的算术平均值小于D的90%,则可以对取自CD批次的另外100个单元产品进行重新辐照。如果单元产品接受的最高和最低剂量的算术平均值小于D的90%,但无菌试验的结果是可以接受,则验证剂量试验可以不必重做。

8.3.4.2根据ISO11737-2(见5.4.1条款)分别对每个辐照后的单元产品进行无菌试验,记录无菌试验的阳性数。指定这个值为CD。 8.3.5 步骤4:结果判断

从本次试验的结果中按以下获得首次无阳性剂量(FNP): c) 如果CD≤2,FNP=DD;

d) 如果2

f) 如果CD>15,其原因不能确定,实施纠正措施并重新确定D. 8.3.6 步骤5:确定灭菌剂量

8.3.6.1 根据FNP和FFP的差值使用公式(8)确定DS。

DS=1.6+0.2(FNP-FFP) (8)

注:使用公式(8),如果(FNP-FFP)<0,设定(FNP-FFP)=0。 8.3.6.2 使用公式(5)确定D----见8.2.6.2 注:如果CD=0,设定[log(CD)]=0。 8.3.6.3 使用公式(9)计算灭菌剂量

DS=D +[-log(s)-2](DS) (9) 其中:D:为达到SAL为10最终确定的剂量; S:为预先选择的灭菌保证水平;

DS:要求杀灭90%存活于DD剂量下的微生物所期望的剂量。 9 方法VDmax---以25kGy或15kGy作为灭菌剂量的证明 9.1 原理

实际上,本方法对于证明一选择的灭菌剂量类似于方法1的剂量设定(见第7条款);它也要求进行生物负载确定和实施验证剂量试验。

在实施证明中,本方法验证了灭菌前产品上的生物负载对辐照的抗力比有最大抗力的微生物群要低,符合以选择的灭菌剂量辐照获得s为10。验证是以在s为10用10个单元产品实施验证剂量试验。对这个s所对应的剂量(最大验证剂量,VDmax)具有其生物负载水平和相关的最大抗力的特征。在确定对于一个特别的生物负载水平的最大抗力,适当的计算已经获得SDR的多种抗力组成(见表3),后者是方法1的基础。高抗力SDR的组成对获得

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10-6灭菌保证水平的影响已经用于确定最大抗力的本证明方法的基础。这样,SDR的保守水平,和方法1的一样被保留。见Kowalski 和Tallentire,1994;Kowalski,Aoshuang 和Tallentire,2000;和Kowalski 与Tallentire, 2003.

在实践中,用平均生物负载来做决定。从表中读出这个平均值所对应的VDmax剂量;用这个剂量来实施验证剂量试验。在VDmax剂量下辐照十个单元产品或其部分,并分别进行无菌检验。如果在这10个试样的无菌试验结果不超过一个阳性,则预先选择的剂量证明是合适的。

ISO11137本部分给出的VDmax方法是用于灭菌剂量为25kGy和15kGy的选择。以25kGy的方法适合于平均生物负载小于或等于1000的产品( 见9.2或9.3 及表9),同样15kGy的方法仅适用于生物负载小于等于1.5的产品(见表10)。VDmax方法包含的15kGy方法提供了对于平均生物负载低的产品确定灭菌剂量使用方法1的一个替代方法。为了区别这两个VDmax方法的应用以及他们相关的验证剂量值的设置,在VDmax术语上添加 “25”或“15”上标,即:VDmax和VDmax。

注:表9中对于不同水平的平均生物负载检索VDmax值展示了生物负载水平和VDmax值之间变化的关系。当生物负载增加到80的水平时,正如期望数值是逐渐增长的,然而,在生物负载达到80,VDmax达到一个最大值,并且其后更高的生物负载水平所对应的VDmax值开始递减,同样的增长而后减少可以在VDmax值中见到(见表10)。这种现象不是表格或VDmax值计算错误的结果。这是构建VDmax方法达到和方法1相同的保守水平的一个必然的结果(见Kowalski和Tallentire,2003[15])。 9.2 VDmax25方法对多个生产批次的程序 9.2.1 总则

9.2.1.1 本方法仅适用于平均生物负载≤1000的产品。

9.2.1.2 对平均生物负载≤0.9的产品使用VDmax25,根据表9应使用整个单元产品,只要产品的平均生物负载〉0.9,SIP就可以使用。 9.2.1.3 使用VDmax25方法,以下五个步骤应遵从。 注:实例见11.3

9.2.2 步骤1:取得单元产品样本

根据5.1,5.2和5.3要求,在三个独立的生产批次中各选择至少10个单元产品。 9.2.3 步骤2:确定平均生物负载

9.2.3.1 在确定生物负载时提供修正因数(见ISO11737-1)。 9.2.3.2 确定每个选择的单元产品的生物负载并计算: a) 三个批次样本每批的平均生物负载(批次平均) b) 所有选择的单元产品的平均生物负载(总体平均负载)

注:生物负载一般由单独的单元产品确定,但是当生物负载较低(例如<10),可能需要合并

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10个单元产品来确定批次的平均生物负载。这个规则不适用于SIP,SIP不可被合并,当然可以选择更大的SIP。

9.2.3.3将三批产品的平均生物负载进行比较,确定是否有一个批次的平均值比总体平均生物负载大两倍或两倍以上。 9.2.4 步骤3:获得VDmax剂量

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使用以下数据从表9中获得VDmax剂量:

a)若一批或更多批次的平均生物负载≥总体平均生物负载*2,则用最高批次值;或 b)若每个批次的平均生物负载<2*总体平均生物负载,则用总体平均生物负载。

对于p=1.0,如果在表9中没有给出平均生物负载,使用最接近于计算的平均生物负载所列出的较大值。

对于p<1.0,用SIP的平均生物负载除以SIP小数值计算对于整个单元产品(p=1.0)的平均生物负载。如果在表9中没有给出计算的平均生物负载,使用最接近于计算的平均生物负载所列出的较大值来查找p=1.0 VDmax和对应的SIP剂量递减因数。

注:产品的平均生物负载≤0.9不允许使用p<1.0 ( 见9.2.1.2)。

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表9---对生物负载水平≤1000CFU的VDmax值和剂量递减因数 平均生物负载 ≤0.1 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 25

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P=1.0 P剂量递减 25VDmax值(kGy) 因数(kGy) 0.0 0.9 1.4 1.8 2.2 2.5 2.7 2.9 3.1 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.8 5.2 5.5 5.7 5.9 6.1 6.2 6.3 6.5 6.6 6.7 6.7 6.8 6.9 n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa n/aa 4.17 4.05 3.97 3.91 3.86 3.82 3.79 3.76 3.73 3.71 3.69 3.67 3.65 3.64 3.62 平均生物 负载 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 220 240 260 280 300 325 350 P=1.0 P剂量递减 25VDmax值(kGy) 因数(kGy) 8.8 8.9 8.9 9.0 9.1 9.1 9.2 9.1 9.1 9.1 9.0 9.0 9.0 8.9 8.9 8.9 8.8 8.8 8.8 8.7 8.7 8.7 8.6 8.6 8.6 8.6 8.5 8.5 3.25 3.23 .321 3.20 3.19 3.17 3.15 3.11 3.08 3.05 3.01 2.96 2.91 2.86 2.83 2.79 2.76 2.72 2.69 2.67 2.64 2.60 2.56 2.52 2.49 2.46 2.43 2.40 共 48页, 第 24 页

ISO11137-2 8.5 9.0 9.5 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 22 24 26 28 30 35 40 45 7.0 7.0 7.1 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.6 7.7 7.8 7.8 7.9 8.0 8.1 8.1 8.2 8.3 8.4 8.6 8.7 3.61 3.59 3.58 3.57 3.55 3.53 3.51 3.50 3.48 3.47 3.46 3.45 3.43 3.42 3.40 3.39 3.37 3.36 3.34 3.31 3.29 3.27 25

375 400 425 450 475 500 525 550 575 600 650 700 750 800 850 900 950 1000 a8.5 8.4 8.4 8.4 8.4 8.4 8.3 8.3 8.3 8.3 8.3 8.2 8.2 8.2 8.2 8.1 8.1 8.1 2.37 2.34 2.32 2.30 2.28 2.26 2.24 2.22 2.21 2.19 2.16 2.14 2.12 2.09 2.07 2.05 2.04 2.02 表示不适用;当平均生物负载≤0.9,整个产品(p=1.0)应被使用,因此不提供SIP剂量递减因数。 [15]

使用公式(10)计算SIP的VDmax值(见Kowalski和Tallentire,2003

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p VDmax=(p=1.0 VDmax)+(p剂量递减因数* log p) (10) 9.2.5 步骤4 实施验证剂量试验

9.2.5.1 从单一的产品批次中选择10个单元产品。 步骤4的10个单元产品可以从步骤2确定生物负载的其中一个批次中选择,或从能代表正常生产条件下制造的第四批产品中选择。在选择所用的批次时应考虑该产品支持微生物生长的能力。

9.2.5.2 用从表9中得到的VDmax剂量或由公式(10)导出的剂量对这10个单元产品进行辐照。确定剂量,单元产品接受的最大剂量不可超过VDmax剂量的10%。如果单元产品的最高和最低剂量的算术平均值小于VDmax剂量的90%,则验证剂量试验可重做。如果这个平均剂量小于VDmax剂量的90%,但无菌试验的结果是可接受的(见9.2.6),验证剂量试验可以不必重做。

注:如果VDmax=0.0kGy,单元产品是不必辐照的。

9.2.5.3依据ISO11737-2(见5.4.1)分别对辐照后的单元产品(见9.2.5.2)进行无菌试验,记录阳性样本数。 9.2.6 步骤5:结论说明

9.2.6.1 如果10个样本的无菌试验不超过一个阳性样本,则验证可以接受,因此证实25kGy作为灭菌剂量。

9.2.6.2如果10个样本的无菌试验出现两个阳性样本,实施一证实的验证剂量试验(见9.2.7)。

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